| |
| |
| |
| 文章出处：中国论文下载中心 发布时间：2005-11-11 |
氧化呼吸链受阻，致ROS外漏。（2）活化黄素蛋白依赖的超氧化物酶（如NADPH氧
化酶），使H2O2产生增多，后者可通过从线粒体释放Cyto-C，活化caspase-3并裂
解多聚ADP核糖多聚酶(PARP)而介导凋亡（PARP在DNA受损时可识别并结合到DNA断
裂处被激活而参与DNA的修复，是细胞凋亡中第一个被鉴定为由caspase-3降解的D
NA修复酶）；又可通过与线粒体巯基形成复合物而降低GSH的活性等途径使ROS清除
减少。故砷剂可通过改变细胞内的氧化还原状态诱导凋亡。但将细胞培养于氧浓度
低于10ppm不可能产生ROS的条件下，仍可发生凋亡，故这可能只是机制之一。
2.3 快速调变PMLRARα融合蛋白的亚细胞定位
APL细胞特征性染色体易位t(15;17)导致早幼粒细胞白血病基因(PML)和维甲酸受体
α基因(RARα)融合，表达PML-RARα融合蛋白。通过转基因小鼠实验可证实PML-R
ARα融合蛋白是APL发病的主要分子基础。体外研究表明，PML-RARα融合蛋白既阻
断APL细胞的分化，也使APL细胞凋亡受阻。早期认为砷剂通过降解此蛋白而诱导A
PL细胞凋亡，称之为维甲酸受体信号通路[4]。正常血细胞中野生型PML与RARα等
共定位于核体(PODs)中。大多数APL细胞因PML-RARα与PML形成异二聚体而使PODs
结构解体，阻止细胞分化及抑制凋亡。砷剂使PML， PML-RARα重新共定位于PODs
并快速降解之。该现象与APL细胞凋亡以及二硫键还原剂二硫苏糖醇(DTT)抑制NB4
细胞凋亡与抑制PML-RARα快速降解在时相上均有一定的相关性，被认为是砷剂治
疗APL的机制之一。但有实验显示[5]，在PML－小鼠(不含PML基因的小鼠)，As2O3
同样能抑制细胞增殖及诱导凋亡，且其诱导凋亡效应不仅见于APL细胞，还可见于
非霍奇金淋巴瘤细胞、慢性淋巴细胞白血病细胞及某些正常细胞，故其诱导凋亡机
制是非特异性的，维甲酸受体信号通路并非是砷剂诱导凋亡的惟一机制。
2.4 抑制Bcl-2基因
Bcl-2基因即细胞淋巴瘤/白血病-2基因是研究最早的与凋亡有关的基因[6～9]，是
一种凋亡抑制基因，又称长寿基因，是维持癌细胞无限制生长的主要基因。Bcl-2
家族包括Bcl-2、Bax、Bcl-X、Bcl-w、Bak、Bad、A1 、NR-13和Mcl-1，其中Bax、
Bak、Bcl-Xs是促凋亡因子，其余为抗凋亡因子。Bcl-2对细胞周期无明显影响，而
对细胞死亡的干扰有选择性，阻止了细胞死亡的最后途径，包括核苷酸内切酶对D
NA的降解。Bax是Bcl-2的一种同源蛋白，Bax既可以形成同聚体，又可与Bcl-2形成
异二聚体，Bax蛋白与Bcl-2蛋白的比值影响着细胞受到刺激后发生凋亡的比率。目
前认为，Bcl-2家族促凋亡因子和抗凋亡因子的相对表达水平至少部分决定了细胞
对凋亡信号的反应性。大量实验表明，Bcl-2与Bcl-X l能够抑制MPT开放和维持线
粒体△ψm，进而抑制Cyto_C和AIF从线粒体释放入胞浆并阻断了ROS的生成，增加
胞内GSH含量并促进其向核内转移，即有细胞内抗氧化作用。在砷剂诱导的NB4、U
937及B细胞白血病细胞系LyH7细胞凋亡中Bcl-2表达下调[10]。在1.0μM As2O3诱
导NB4细胞凋亡时[11],CPP32（caspase3）被激活和降解PARP，同时Bcl-2不仅在m
RNA水平而且在蛋白质水平均被下调；而在1.0μM As2O3诱导恶性淋巴性白血病细
胞凋亡过程中既无CPP32激活又无Bcl-2调变，提示砷剂诱导的凋亡中Bcl-2发挥的
作用各异。有实验表明，2.5μM As2O3[12]使肝癌细胞系Hep201Bcl-2表达明显下
降，而凋亡的促进因子Bax的表达明显增加，两种基因表达比例发生变化。又有报
道，10μM As2O3处理人肝癌QGY-7701、QGY-7703细胞48小时后其Bcl-2基因表达明
显下降，Bax和Fas基因表达明显增强，Bax蛋白与Bcl-2蛋白比值增加。对Bax、Bc
l-Xl等基因是否表达各报道不同[13～15]。Bcl-2的过度表达可抑制砷剂诱导的凋
亡相关现象，而通过反义技术使Bcl-2下调可抑制细胞增殖及促进凋亡。综上所述
，砷剂可通过对Bcl-2基因的抑制诱导某些肿瘤细胞的凋亡。但As2O3并不影响恶性
淋巴瘤细胞及某些成神经细胞瘤细胞系Bcl-2（Bcl-Xl）的表达，提示Bcl-2可能不
是参与诱导以上细胞凋亡的主要中介。
2.5 抑制NF-κB的活化
核转录因子NF-κB（nuclear factor-κB）是1986年首先于B细胞中发现的一种结
合于免疫球蛋白κ轻链增强子上的核蛋白[16]。在正常情况下，NF-κB与其抑制物
IκBα结合，存在于细胞浆中，IκBα遮蔽着NK-κB的基因定位序列（NLS），NF
-κB的生物学活性不表现出来。当细胞受到外界因素（包括细菌或病毒感染、炎症
细胞因子、TNF、LPS、紫外线照射、电离辐射）等刺激时，IκBα将发生磷酸化并
|
|
| [返回顶部↑]
|
|
|
| |
|
|
|
|
| |
|
